Prosedur Pengencer Semen

Penambahan larutan pengencer

·               Perhitungan jumlah spermatozoa motil setelah thawing

a.        Hitung data menggunakan computer

b.        Hitung persentase spermatozoa motil setelah thawing minimaql 40%

c.        Jumlah spermatozoa motil minimal 12.000.000 (1 straw berisi 30.000.000).

·               Perhitungan volume total

V.total (ml) =     vol.semen (ml) x konsentrasi spermatozoa (jt/ml)

                                Konsentrasi spermatozoa pada 1 ml (cc)

·               Perhitungan jumlah pengencer

Jumlah pengenceran =                        v. total (ml)

                                               v. total semen yang diperoleh (ml)

·               Perhitungan volume larutan  pengencer A2 yang ditambahkan

V. Larutan pengencer =V.total (ml)- Σ V.semen(ml)+V.lar A1 (ml))

 A2 yang ditambahkan          2

·               Perhtiungan volume larutan pengencer B yang ditambahkan

V.larutan pengencer B yang ditambahkan (ml)  =  V.total (ml)

                                                                                              2

·               Perhitungan dosis atau jumlah straw yang digunakan

               Dosis  = V.total (ml)

                                    0,25

 

Contoh Perhitungan:

1.    Volume total

Penampungan ke -	Volume Semen (ml)	Konsentrasi Spermatozoa ml)	Total konsentrasi spermatozoa
1. 2. Total	6.0 4.0 10.0	1.200.000.000 1.000.000.000	7.200.000.000 4.000.000.000 11.200.000.000

     Volume total  =             11.200.000.000     =     93.33 ml

                                         30.000.000 x1/0.25

2.   Jumlah pengenceran

      Jumlah Pengencaran  =      93 ml    =   9.3  kali

                                                      10 ml 

3.   Volume larutan pengencer A2 yang ditambahkan

      Lart. Pengencer A2 yang ditambahkan) =

      93 ml -  {(6 ml semen + 6 ml lar. A1) + (4 ml + 4 ml lar A1)}  =  26.5

        2

4.    Volume pengencer B yang ditambahkan  =  93 ml  =  46.5 ml

                                                                                  2

5.    Banyaknya dosis yang akan digunakan

      Dosis  = 93 ml   =  372 dosis

                      0.25

Penambahan Pengencer A2 pada Semen

1. Penambahan Pengencer A2

-      Penambahan pengencer A2 sesuai dengan perhitungan yang sudah dilakukan

-      Persiapan alat dan bahan :

a.        Yang bias digunakan berulang-ulang  : tabung ukur, gelas ukur, handuk.

b.        Alat yang sekali pakai : labu elemeyer, glass filter]

c.        Bahan :  larutan pengencer A

-      Saat penambahan pengencer A2 suhu larutan semen A1 harus 4-5 ºC (suhu larutan yang tinggi dapat menebabkan temperature shock pada spermatozoa)

2. Penyaringan semen

• 50 menit kemudian dilakukan pencampuran dengan Part A Extra yang telah disiapkan dalam cool top;
• Setelah itu pencampuran dengan Part B dilakukan 4 kali (proses gliserolisasi) dengan interval 15 menit;
• Kurang lebih 2 ½  jam setelah pencampuran dengan Part B terakhir (5 jam setelah pencampuran dengan Part A primer), baru dilakukan rposes pengisian semen ke dalam straw yang telah disiapkan sebelumnya.